تولید، خالص سازی و بررسی مهارکننده های آنزیم پلی گالاکتوروناز قارچ m. phaseolina

پایان نامه
چکیده

پلی گالاکتوروناز قارچmacrophomina phaseolina (عامل بیماری پوسیدگی ذغالی در طیف وسیعی از گیاهان) از عوامل مهم بیماریزایی قارچی جهت نفوذ به سلول میزبان گیاهی می باشد. در این پژوهش به منظور بررسی خصوصیات و افکتورها، این آنزیم با استفاده از کروماتوگرافی تعویض یونی خالص سازی گردید. بیشترین فعالیت آنزیم خالص با وزن مولکولی تقریبی 80 کیلو دالتون، در اسیدیته 3 و دمای 60 درجه سانتی گراد بود. آنزیم از پایداری دمایی و اسیدیته بالایی برخوردار بود به طوریکه، نیمه عمرحرارتی آن در دمای 90 درجه سانتی گراد 177 دقیقه است که حاکی از پتانسیل بالای این آنزیم جهت کاربرد در صنایع می باشد. انرژی اکتیواسیون و تغییرات آنتالپی غیر فعال سازی حرارتی آنزیم به ترتیب kj/mol 15/26و kj/mol12/41 بود. بررسی کینتیک آنزیم (10/1 = nh و 1/7 = rs)، الگوی کینتیک غیر میکائیلیس-منتن با اتصال تعاونی مثبت به سوبسترای پلی گالاکتورونیک اسید را نشان داد. نمودار تغییرات سرعت در برابر غلظت های گوناگون سوبسترای پلی گالاکتورونیک اسید با mg/ml 3 = k0.5 و µmol/min 0/008 = vmax، سیگموئیدی بود. آنزیم آلوستریک است و حداقل دو جایگاه کاتالیتیک دارد. ترایتون x-100، mncl2، feso4، mnso4 و cocl2 موجب افزایش و تویین 20 و 80، pmsf، niso4، bacl2، cuso4، licl و تمامی نمک های فسفات موجب مهار فعالیت آنزیم گردیدند. یدواستامید و یدو استیک تاثیری بر فعالیت آنزیم نداشتند و احتمالا سیستئین، اسیدآمینه کاتالیتیکی آنزیم نمی-باشد.

منابع مشابه

اثر مهاری پروتئین‌های مهارکننده پلی گالاکتوروناز لوبیا بر آنزیم پلی گالاکتوروناز قارچ‌های بیماری‌زای Fusarium oxysporum و Ascochyta rabiei گیاه نخود

Plant pathogenic microorganisms produce a variety of enzymes capable of degrading different polysaccharides of the plant cell walls. Pathogens use these enzymes to penetrate and colonize host cells. Polygalacturonases are thought to be the first cell wall-degrading enzymes secreted by pathogens when they grow on plant cell walls. Oligogalacturonic acids with the polymerization degrees of 10 to ...

متن کامل

اثر مهاری پروتئین‌های مهارکننده پلی گالاکتوروناز لوبیا بر آنزیم پلی گالاکتوروناز قارچ‌های بیماری‌زای Fusarium oxysporum و Ascochyta rabiei گیاه نخود

Plant pathogenic microorganisms produce a variety of enzymes capable of degrading different polysaccharides of the plant cell walls. Pathogens use these enzymes to penetrate and colonize host cells. Polygalacturonases are thought to be the first cell wall-degrading enzymes secreted by pathogens when they grow on plant cell walls. Oligogalacturonic acids with the polymerization degrees of 10 to ...

متن کامل

خالص سازی آنزیم پلی گالاکتوروناز جدایه (IKO6) قارچAscochyta rabiei : عامل بیماریبرق زدگی در نخود

Ascochyta blight caused by Ascochyta rabiei is one of the major diseases of chickpea (Cicer arientinum) in Iran. Many phytopathogenic microorganisms, incuding A .rabiei, attack their host plant by secreting pectic enzymes including polygalacturonase (PG) which causes modification of cell-wall structure, increasing accessibility of cell-wall components for degradation by other enzymes. Polygalac...

متن کامل

خالص سازی آنزیم پلی گالاکتوروناز جدایه (IKO6) قارچAscochyta rabiei : عامل بیماریبرق زدگی در نخود

Ascochyta blight caused by Ascochyta rabiei is one of the major diseases of chickpea (Cicer arientinum) in Iran. Many phytopathogenic microorganisms, incuding A .rabiei, attack their host plant by secreting pectic enzymes including polygalacturonase (PG) which causes modification of cell-wall structure, increasing accessibility of cell-wall components for degradation by other enzymes. Polygalac...

متن کامل

بررسی فعالیت آنزیم پلی گالاکتوروناز مترشحه از ایزوله های ایرانی قارچ Fusarium oxysporum

در این تحقیق شدت بیماری زایی و میزان تولید آنزیم پلی گالاکتوروناز ‹PG›در پانزده ایزوله قارچ Fusarium oxysporum جمع آوری شده از مناطق مختلف ایران مورد بررسی ومطالعه قرار گرفت .در این آزمایش از نخود ایرانی رقم جم و با کشت ایزوله ها در چهار محیط کشت مختلف جهت تعیین شدت بیماریزایی استفاده گردید.آسیب های ناشی از حمله قارچ به قسمت های مختلف گیاهچه به طور روزانه تا روز پنجم مورد مطالعه ...

متن کامل

بهینه سازی تولید، خالص‏سازی و شناسایی پلی گالاکتوروناز از قارچ عامل بیماری ساق سیاه لوبیا

  مقدمه: در این مطالعه، تولید یک پلی گالاکتوروناز از قارچ بومی عامل بیماری ساق سیاه لوبیا، فعال در اسیدیته 3 و مناسب برای استفاده در صنایع آب میوه‏گیری بررسی شد. اشکال مناسب کربن، نیتروژن و فسفر شناسایی و برای تولید بهینه آنزیم به کار گرفته شد .   مواد و روش ‏‏ ها: قارچ عامل بیماری ساق سیاه لوبیا در محیط تولید کشت شد. سکروتوم قارچی جدا شد و از آن پلی­گالاکتوروناز به کمک کروماتوگرافی ستونی به خل...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه صنعتی شاهرود - دانشکده کشاورزی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023